
膜蛋白酵母雙雜交系統(tǒng)(DUAL membrane system)突破了傳統(tǒng)酵母雙雜交的局限,擴大了酵母雙雜交的應(yīng)用范圍。在傳統(tǒng)的酵母雙雜交系統(tǒng)的基礎(chǔ)上,提供了不同于常規(guī)的蛋白體內(nèi)分析方法,使得分析膜蛋白間的互作成為現(xiàn)實。其主要特點是既可以用于表達文庫的篩選,也可以進行膜蛋白-膜蛋白、膜蛋白-可溶性蛋白間的互作關(guān)系驗證。


膜蛋白酵母雙雜交系統(tǒng)是基于分離的泛素(split-ubiquitin)所介導(dǎo)的報告系統(tǒng),即泛素的兩個組成部分:N端部分(Nub)和C端部分(Cub)。Cub可融合能啟動細胞核內(nèi)報告基因表達的LexA-VP16轉(zhuǎn)錄激活因子。將待檢測蛋白分別構(gòu)建到泛素的兩個組成結(jié)構(gòu)上,通過待檢測蛋白質(zhì)之間的相互作用將突變的、分離的泛素分子N端和C端部分融合,經(jīng)過泛素蛋白酶UBPS的識別和切割使LexA-VP16解離入核,從而激活報告基因表達。

客戶提交實驗材料詳細信息(候選蛋白序列、順式調(diào)控元件DNA序列等)—客戶提交信息確認(rèn)—誘餌菌株及獵物菌株構(gòu)建—誘餌菌株自激活檢測—酵母共轉(zhuǎn)化互作篩選及稀釋點種驗證—數(shù)據(jù)采集及處理并撰寫提交實驗報告

(1)提供足量的大腸文庫甘油菌和文庫質(zhì)?;蛘呓湍肝膸旄视途?文庫容量>1X107 CFU、陽性率>95%);
(2)詳細的word電子版實驗報告(含原始實驗數(shù)據(jù));
(3)陽性克隆測序結(jié)果。